近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术（rapidamplificationofcDNAends，RACE）是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视.经典的RACE技术是由Frohman等（...

每当拿到一个质粒图谱，是不是一下就有点懵了？这些ori、RBS、tet是什么？这些箭头代表什么，转录的方向吗？不要着急，申知心生物把这些告诉你，也许会解决你的困惑。质粒和载体傻傻分不清楚质粒(Plasmid)是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的质粒虽然都是环状构型。载体即要把一个有用的基因（目的基因——研究或应用基因）通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具（交通工具）携带外源基因进...

RTPrimer的佳选择通常RTprimer可分为三类：oligodT，随机引物以及基因特异性引物。OligodT引物之所以应用范围更加广泛，是因为可由此获得mRNA的全长拷贝。然而如果mRNA长度过长4kb，或者没有polyA尾（原核mRNA或rRNA），就需要考虑使用随机引物进行RNA的反转录。随机引物虽能长基因的5’末端的转录，但并不能获得整个基因全长的cDNAs，且对RNA样品质量要求比较高，此时可用6-8个核酸聚合体来提高cDNAs的合成量。而对于真核生物的qPCR...

对于Elisa试剂盒的使用，总有解不完的疑问，比如说加样器不确；特别10ul以下的加样器，对成果影响；保温设备不良；洗刷用水不规范。如何解决这些疑问呢：1、加样不；没有混匀。加样时必定要细心。加样后，再查看，以防漏加、错加。2、加样后，重复抽吸3次混匀，防止血清集合孔底，致使非特异性吸附。洗刷洗刷不①每次灌水洗刷，应停止30秒钟；②选用吸水纸作为衬垫，每次洗刷后扣干孔内水分；3、可选用塑料洗刷瓶。加酶反响漏加滴加后，细心查看各孔成果判别①包含阴性对照孔在内，各孔显色普遍偏深；...

临渊羡鱼阶组里的前辈们看起来个个都是牛人，各有各的事业，可是喂~谁来提挈小生则个！导师：“在咱们这个组的大框架下自己找个坑填上去~”——坑在哪？师姐：“问我问题之前不能先自己查一下嘛？你这个问题明明有现成答案呀~”——上哪查师兄：“去去去，小孩子一边看文献去！”——看不懂~_看什么文献，怎么看？专业术语不懂怎么办？好吧，大不了啃字典，先把组里发过的文章都过一遍好了。终于有一天组会讨论时，哇我居然听懂了跃跃欲试阶已经能相当熟练地在知网、NCBI等数据库上查到自己想要的信息了，仪...

虽然说内科和外科都是相亲相爱的一家人，但是细数一下，两者之间还是有一些有趣的差别，看看网友们是如何总结的。区别一：内科大夫多话痨皇上：此番辽国起倾国之力，那萧皇后亲率三十万大军南下，诸位爱卿如何是好？内科大臣:启禀皇上，臣以为还当细细打探方能定夺，不宜早下决定。究竟是萧皇后亲征，还是南院大王统帅？又或者是其他将领？这分型应当明确。三十万兵力应当有所鉴别，据臣所知辽国连续三年大旱，北方更有金人犯境，能聚三十万兵力实在存疑，打个问号。辽国大军南下，是分兵几路？每路兵马几何？还需完...

一、WesternBlot实验为什么要用内参?WesternBlot实验结果进行内参校正已成为一种惯例。目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的组织细胞蛋白上样，才有比较的基础，特别是表达量不高时，上样量的的差别就很有可能影响结果的分析。因此，在WesternBlot试验中，进行内参的检测，有以下两点作用：1、校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差，实验结果的准确性；2、使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否、整个WesternBlot显色发光体系是否正常。二、你的内...

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。ELISA免疫测定目的是？1.测定体液中的各种蛋白质，包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等；2.测定激素，包括小分子量的甾体激素等；3.测定抗生素和药物；4.测定病原体...