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Product Center
产品简介
利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。细胞荧光染色实验是常见细胞实验之一。
| 品牌 | 其他品牌 |
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4% 多聚甲醛室温固定 15–20 min
PBS 洗 3×5 min
0.1% Triton X-100 室温 10 min
PBS 洗 3×5 min
膜蛋白不用通透。
5% 牛血清白蛋白（BSA）或山羊血清
室温封闭 30–60 min，减少非特异性结合
滴加一抗（按说明书稀释，通常 1:100–1:1000）
4℃ 湿盒过夜
次日 PBS 洗 3×5 min
荧光二抗（FITC 绿 / Cy3 红 / Alexa 系列）
室温避光孵育 1 h
PBS 洗 3×5 min
DAPI 染色 5 min
PBS 洗去多余染料
抗荧光淬灭封片剂封片
4℃ 避光保存，尽快拍片
DAPI（蓝）：所有细胞核
目标蛋白（绿 / 红）：阳性表达部位
共定位：黄色（红绿叠加）
可半定量：
平均荧光强度（Mean Fluorescence Intensity, MFI）
阳性细胞比例
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