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细胞增殖实验

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细胞增殖实验
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础,是细胞Z基本的生理活动。生长因子、激素及癌基因产物等均可诱导细胞的增殖或抑制细胞的增殖,通过影响细胞周期、诱导细胞凋亡而实现。

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更新时间:2023-08-29
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细胞增殖实验
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础,是细胞基本的生理活动。生长因子、激素及癌基因产物等均可诱导细胞的增殖或抑制细胞的增殖,通过影响细胞周期、诱导细胞凋亡而实现。

通过细胞分裂,可以将复制的遗传物质,平均地分配到两个子细胞中去。细胞增殖实验包括MTT法和CCK8法。


细胞增殖实验

MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide。MTT比色法是常用的检测细胞存活和生长的方法之一,其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在细胞数范围内,甲瓒结晶形成的量与细胞数成正比,因此490nm波长处的吸光值可间接反映活细胞数量。该方法已广泛用于抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。

Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓*(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。


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