CCK8实验服务

CCK8实验是一种基于比色法的细胞增殖和毒性检测方法，广泛应用于药物筛选、细胞活力评估等领域。其实验原理是通过WST-8试剂与活细胞线粒体脱氢酶反应生成水溶性橙黄色甲臜，其生成量与活细胞数量成正比，通过检测450 nm波长处的吸光度（OD值）间接反映细胞活性。

实验步骤（以96孔板为例）：

1. 细胞接种：将对数生长期的细胞以适当密度（如4×10³~6×10³个/孔）接种至96孔板，确保均匀分布。

2. 药物处理：根据实验设计加入不同浓度的药物或待测物质，设置对照组（如wan全培养基）和复孔（通常3个/组）。

3. 孵育：在37℃、5% CO₂培养箱中孵育特定时间（如24~72小时），部分实验需中途更换培养基。

4. 添加CCK8试剂：每孔加入1/10体积的CCK8溶液（如10 μL），避光孵育1~4小时（时间需优化）。

5. 检测OD值：使用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度，记录数据并绘制生长曲线。

注意事项：

• 试剂保存：CCK8试剂需避光保存于4℃，避免反复冻融；含强还原剂（如维生素C）的培养基可能干扰结果。

• 操作规范：加入试剂后避免晃动培养板，防止细胞脱落；确保细胞充分贴壁且密度适中。

• 标准化：建议预先绘制标准曲线，校准细胞数量与OD值关系，并控制孵育时间以提高重复性。

• 数据解读：需结合统计分析（如t检验或ANOVA），关注药物浓度与细胞活力的相关性，并排除实验干扰因素。