技术文章
Technical articles(1)浓盐法利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1MNacl抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的CCL3一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及CCL3相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA钠盐沉淀出来.也可用0.15MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按CCL3---异醇法除去蛋白.两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.以稀盐酸溶液提取DNA时,加...
2017年3月1日至3月20日项目申请集中接收期间,自然科学基金委员会(以下简称自然科学基金委)共接收项目申请190840项,经初步审查和复审后共受理187135项。依据《自然科学基金条例》和自然科学基金相关管理办法,经评审和委务会议审批,决定资助面上项目18136项、重点项目667项、重大项目2项、重点(地区)合作研究项目107项、青年科学基金项目17523项、青年科学基金项目399项、创新研究群体项目38项、海外及港澳学者合作研究基金项目142项、地区科学基金项目301...
蛋白质组一词源于蛋白质与基因组两个词的组合,意指“一种基因组所表达的全套蛋白质”,即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。蛋白质组学本质上指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征,包括蛋白质的表达水平,翻译后的修饰,蛋白与蛋白相互作用等,由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生,细胞代谢等过程的整体而的认识。近两年来蛋白质组研究技术已被应用到各种生命科学领域,如细胞生物学、神经生物学等。在研究对象上,覆盖了原核微生物、真核微生物、植物和动物等范围,涉及到各种重要的生物学现象,如信...
一、服务介绍免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗体与抗原间的特异性结合特性,将抗原(我们感兴趣的靶蛋白)-抗体复合物从样品中分离出来,达到初步分离纯化靶蛋白的目的。之后,样品可以再进行Westernblot分析。二、实验原理免疫沉淀是利用抗原与抗体免疫反应达到纯化,定性检测蛋白的目的,即在蛋白质提取液中加入与抗原(靶蛋白质)特异性结合的抗体,抗体与抗原结合后形成免疫复合物,再与蛋ProteinA/G或二抗偶联的琼脂糖珠子孵育,通过离心得到免疫复合...
一、服务介绍PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。随着医学实验技术的发展,糖原染色应用的范围更加广泛,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断,糖原累积病诊断和研究,糖尿病的诊断和研究,用于某些肿瘤的诊断等。二、实验原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。PAS染色一般用来显示糖元和其它多糖物质。过...
1.选择好的RNA分离方法现有众多的RNA分离方法也许令人难以取舍。目前简单也是安全的方法是柱式分离,如RNApure因为操作简单,时间短,纯度高而受到大家的喜爱,RNApure不需要DNA酶消化DNA,节省了时间,避免RNA的降解,从而提高了产量;相对非柱式分离(如TRIZOL),去除蛋白及其他杂质干净,提高了纯度,对于细胞、组织、一般植物均非常适合。植物RNA的提取比较难抉择,植物RNA提取受酚、多糖、蛋白杂质、次生代谢物含量的影响,一般用TRIZOL提取纯度不高,而且很...
1.迅速灭活内源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3个方法均可有效使内源RNA酶失活:1)用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品,并立即匀浆。2)用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是:组织块足够小,在浸入液氮的瞬间就能冻结,以瞬间令RNA酶失活。3)立即将样品置于RNAfixer无液氮RNA样品储存液中。它是一种水相、无毒的收集试剂,能立即稳定并保护完整、未冻结的组织和细胞样品中的RNA。关键要点是组织样品切片要够薄(),这样RNAfixer才能在RNase破坏RNA之前迅速...
Elisa试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)、已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。Elisa试剂盒试验过程中需要特别注意的细节1、试剂准备:试剂都在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存。实验操作中使用一次性吸头,避免交叉污染;2.加样:加样时,...