小鼠去卵巢心肌缺血再灌注模型构建

一、模型构建目的

该模型主要用于模拟绝经后女性因雌激素水平下降导致的心血管疾病易感性，探究雌激素缺乏与心肌缺血再灌注损伤的关联。例如，研究显示去卵巢后的小鼠心肌损伤加重，而中药桃红四物汤通过激活Nrf2/HO-1通路可减轻这种损伤。

二、构建步骤

1. 去卵巢手术

• 动物选择：6-8周龄雌性小鼠，确保性成熟且未自然绝经。

• 手术方法：实施双侧卵巢切除术，che底清除雌激素来源，术后需等待2-4周以模拟稳定的绝经状态。

2. 心肌缺血再灌注手术

• 麻醉与准备：采用腹腔注射麻醉（如戊ba比妥钠），气管插管连接呼吸机维持呼吸。

• 手术入路：左胸外侧切口，钝性分离肌肉至第3-4肋间隙，撑开胸腔暴露心脏。

• 缺血操作：结扎左前降支冠状动脉（LAD）30-60分钟，造成心肌缺血；松开结扎线恢复血流模拟再灌注（通常持续2-24小时）。

• 关胸与缝合：逐层缝合胸腔，术后撤除呼吸机并监测自主呼吸恢复。

三、术后管理

• 镇痛与抗感染：术后给予bu托啡诺等镇痛药物，并预防性使用抗生素。

• 生命体征监测：观察小鼠活动、呼吸及心电图变化，确保术后恢复稳定。

四、模型评估方法

1. 功能评估：

• 心电图（ECG） ：检测ST段抬高、T波倒置等缺血再灌注特征性变化。

• 心脏超声：评估左室射血分数（LVEF）等血流动力学指标。

2. 组织学评估：

• TTC染色：量化心肌梗死面积，正常心肌呈红色，坏死区域苍白。

• HE染色：观察心肌炎症细胞浸润及组织结构破坏。

3. 生化指标：

• 检测血清CK-MB、cTnI等心肌损伤标志物，以及TNF-α、IL-6等炎症因子水平。

五、研究应用示例

1. 机制研究：

• TSPYL5蛋白在缺血再灌注后表达显著下调，提示其可能与损伤相关。

• Rho激酶抑制剂（如法舒地尔）通过抑制白细胞聚集减少心肌梗死面积。

2. 药物干预：

• bu托啡诺预处理可降低Caspase-3活性及炎症反应，减轻心肌损伤。

• 盐酸戊乙奎醚通过调节MIF/AMPK通路发挥保护作用。

3. 基因调控：

• 敲除vaspin基因加重损伤，而过表达HINT2基因可改善微循环及线粒体功能。

六、注意事项

• 手术技巧：需精细操作以减少胸腔出血和应激反应，避免影响实验结果。

• 模型稳定性：曾有报道称模型可能出现重复性问题，可能与麻醉深度、结扎位置或术后护理有关。

• 代谢影响：去卵巢可能改变小鼠代谢状态（如糖脂代谢），需在实验中设置对照组。