上海细胞划痕实验.

                           上海细胞划痕实验.
细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。

上海细胞划痕实验.实验内容：

材料：6孔板（其他的也可以，但感觉6孔比较好，大小适中），MARKER笔，直尺，20微升枪头（灭菌），无血清培养基，PBS

步骤：能灭菌的器械都要灭菌。MARKER笔，直尺在操作前紫外照射30MIN（超净台内）

1.先用MARKER笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔0.5-1cm一道，横穿过孔，每孔至少穿过5条线。

2. 在空中加入约5*105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过液能铺满

3. 第二天用枪头比着直尺，尽量垂直于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜

4. 用PBS洗细胞3次，去除划下的细胞，加入无血清培养基。

5.放入37度5%CO2培养箱，培养，按0. 6 .12 24小时取样，拍照。

注意事项：

一般做划痕实验，一般都在无血清或者低血清状态下培养的，否则细胞增殖就不能忽略

按照6孔板背后划线的垂直方向划痕，可以形成若干交叉点，作为固定的监测点，这就解决了前后观察时位置不固定的问题。