Timm染色实验

 Timm染色实验
用于锌离子组织化学定位的方法银染法(neo-Timm）硫化银法,neo-Timm法是对离子状态、 疏松结合或螯合状态下的锌离子染色,便于光、电镜的观察.

Timm染色方法是一种能够显示组织细胞内重金属分布的常用方法。苔藓纤维末端是脑内含锌量高的区域，因此可以用此方法显示苔藓纤维末梢分布的情况。

Timm组织化学染色（Timm染色实验）：
1.  切片贴附于多聚赖氨酸处理过的载玻片上。（-20°保存）
2.  做的时候拿出来晾干（10分钟）。
3.  把Timm显影剂倒入修复盒中，放在在26℃的水浴箱或恒温摇床里染色90-150min，染色在避光的条件下进行。
4.  染色后，切片用蒸馏水冲洗几遍，可以尼式染色复染，也可不复染。
5.  晾干，中性树脂封胶片。

Timm液的配置：
A:防护胶：30g阿拉伯胶搅拌溶解于60ml去离子水中（充分搅匀溶解）。静置两天，如果有杂质可用双层纱布滤过。胶不急用的话冷冻保存在塑料瓶里可以保存至少6个月。

B：枸橼酸缓冲液：2.55枸橼酸•H2O加2.35枸橼酸钠•2H2O，加去离子水至10ml。
C:还原剂：0.85g对苯二酚（氢醌）溶于15ml的去离子水。
D:银离子供应：0.11g乳酸银（硝酸银）加入15ml的去离子水。乳酸银对光高敏感，因此此溶液应当避光。
A B C溶液小心混合，D溶液在用之前立即加入。一次做八到十张片子比较合适。

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图片，结果及分析

实验周期：3-4周