TGFβ 驱动的非典型 EMT 通过规避免疫机械监视维持肺腺癌休眠转移

肿瘤细胞远端转移后常进入长期“休眠"，但它们如何在免疫监视与组织微环境压力下维持存活、并在未来某个时点重新爆发，机制仍不清晰。尤其是 EMT 并非单一状态：不同形式 EMT 的“力学表型"与免疫逃逸之间是否存在因果链条，一直缺少直接机制证据。

该研究显示：在肺腺癌（LUAD）休眠转移模型中，TGFβ 诱导的 EMT 会从“典型全 EMT（应力纤维丰富、迁移性强）"进一步转变为一种“非典型 EMT（细胞变圆、缺乏应力纤维、皮质肌动蛋白为主）"；这一转变由肌动蛋白去聚合蛋白 gelsolin（GSN）驱动，导致细胞生物力学刚度下降，从而降低被 NK/CTL 等细胞毒性淋巴细胞“机械监视/力学杀伤"的概率，帮助休眠细胞在免疫监视下存活。

结论 1：休眠转移细胞存在持续的 TGF-β 信号活性，且 TGF-β 对“长期潜伏后仍具转移爆发能力"的维持至关重要

作者在休眠播散细胞中观察到持续的 TGF-β 报告基因活性并伴随低 Ki67 等静息表型；更关键的是，在免疫细胞“早期清除"与“晚期解除监视（模拟潜伏后免疫松动）"两种情境下，Tgfbr2 敲除对晚期爆发的抑制更显著：晚期去除 NK/CD4/CD8 后，Tgfbr2-KO 组转移爆发显著减少，提示 TGFβ 信号并非只是“进入休眠"的触发器，更像是“长期维持可存活/可再起"的必要条件之一。

Fig1. 休眠LUAD细胞中的重要TGFβ信号传导

结论 2：持续 TGF-β 刺激诱导“先典型 EMT、后非典型 EMT"的时间序列，并与增殖静息耦合

在 dormancy-competent 的 LUAD 祖细胞模型（如 LCC）中，TGF-β 早期诱导典型 EMT：细胞拉长、上应力纤维、迁移增强；但随着刺激持续，细胞逐渐变圆、应力纤维消失、运动性下降，同时 EMT 转录程序仍然上调（“形态/力学"与“转录 EMT"出现解耦），并伴随 Ki67 下降、p27 等静息标志上升。

Fig2. 静止相关EMT对TGF-β的反应

结论 3：GSN 是 TGF-β 驱动“非典型 EMT + 静息"联动的关键枢纽，且其上调与增强子乙酰化及单细胞轨迹一致

作者从 RNA-seq 中锁定 GSN 等细胞骨架调控基因，并验证 GSN mRNA/蛋白在 TGF-β 持续刺激下逐步上升；ChIP-seq/ChIP-PCR 指向 GSN 位点增强子 H3K27ac 升高；单细胞转录组时间序列显示：GSN 高表达细胞往往同时具有更高 EMT 得分与更强静息特征，提示 GSN 并非旁观者，而是贯穿状态转变的“轴心变量"。

Fig3. Gelsolin与静止的EMT结合

结论 4：GSN 介导的肌动蛋白重塑降低细胞刚度，从而削弱 NK/CTL 介导的“机械监视式杀伤"，并在体内决定休眠细胞能否逃避免疫监视

功能上，GSN 敲低不影响早期“拉长"的诱导，但会阻断后期向“变圆/皮质肌动蛋白为主"的转变；力学层面，作者用力学测量显示 GSN 敲低提高细胞刚度；免疫效应层面，TGF-β 处理 7 天（更偏“非典型 EMT"状态）的细胞相较 3 天更耐 CTL 杀伤且引发更弱的 CTL 激活；而 GSN 缺失细胞虽然可以进入休眠，但更容易在免疫监视下被清除。作者还通过“直接操控肌动蛋白状态"的方式（如 DeAct）对免疫敏感性进行回证，强化了“骨架→刚度→免疫杀伤概率"的因果链。

Fig. 4 细胞刚度降低所致的免疫逃逸表型

研究逻辑总结：

1）先在体内休眠转移模型中确认：长期潜伏的转移细胞呈现持续 TGF-β 活性与静息特征，并用 Tgfbr2-KO + “早/晚期免疫去除"实验将 TGF-β 的作用从“进入休眠"推进到“维持潜伏爆发能力"。

2）再把关键现象在体外重建为时间序列：TGF-β 诱导典型 EMT → 进一步转入缺乏应力纤维的非典型 EMT，并伴随细胞周期停滞。

3）随后用组学锁定并验证 GSN：TGF-β 诱导其表达与增强子活化，单细胞测序显示 GSN 是 EMT 与静息共同演化的关键。

4）最后把“骨架重塑"落到“力学表型"与“免疫杀伤结局"：刚度下降带来 NK/CTL 杀伤逃逸；GSN 缺失则提高刚度、提高被杀概率，并在体内决定休眠细胞存亡。