大鼠动脉粥样硬化模型

一、模型建立的病理学基础

动脉粥样硬化是脂质代谢异常、炎症反应与血管损伤共同作用的结果。大鼠模型需满足以下特征：

1. 脂质浸润：总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）显著升高，高密度脂蛋白（HDL）降低；

2. 血管损伤：内皮剥脱、平滑肌增生及泡沫细胞聚集；

3. 钙化与炎症：血管壁钙盐沉积，血清CRP、IL-1β等炎症因子升高。

二、主流建模方法及技术细节

（一）基础诱导法

1. 单纯高脂饲料法

• 配方：1-3%胆固醇 + 10-15%猪油 + 0.5%胆酸钠 + 0.2%丙硫氧嘧啶（抑制甲状腺功能减少胆固醇分解）；

• 周期：8-12周；

• 效果：血脂显著升高（TC > 6 mmol/L），但仅形成早期脂质条纹，斑块不稳定；

• 局限性：成模率<50%，需与其他方法联用。

2. 高脂饲料联合维生素D

• 机制：维生素D3（60-70万U/kg）通过诱导高钙血症加速血管钙化和内皮损伤；

• 操作：

• 腹腔或肌肉注射维生素D3（分3次，间隔24小时）；

• 联合高脂饲料喂养6-9周；

• 优势：斑块钙化显著，与人类AS病理相似度达80%；

• 优化：分阶段给药（初始60万U/kg，后续每3周补充10万U/kg）可降低死亡率。

（二）复合损伤法

1. 免疫损伤+高脂饮食

• 步骤：

• 免疫致敏：腹腔注射卵清白蛋白（1 mg/kg）或尾静脉注射牛血清白蛋白（250 mg/kg）；

• 炎症诱导：灌胃维生素D3（60万U/kg）并饲喂含FeSO₄的高脂饲料；

• 效果：8周后出现典型斑块，血清CRP升高4倍。

2. 机械损伤+高脂干预

• 球囊拉伤术：

• 手术要点：颈动脉或腹主动脉插入2F球囊导管，充气至3 atm后回拉3次，造成内皮剥脱；

• 术后管理：高脂饲料喂养8周，斑块形成时间缩短至4周；

• 电击损伤法：局部血管电击（50 V，10秒）诱导内皮凋亡，联合高脂饮食。

（三）创新建模技术

1. 基因编辑模型

• ApoE-/-大鼠：通过CRISPR技术敲除载脂蛋白E基因，自发形成AS斑块（普食喂养12周）；

• 应用方向：研究脂蛋白代谢与炎症反应交互作用。

2. 病证结合模型

• 气滞血瘀证模型：冰水浴（0℃，5分钟/天） + 脂肪乳灌胃 + 牛血清蛋白尾静脉注射，模拟AS合并中医证候；

• 评价指标：凝血四项异常（PT延长，FIB升高），舌质紫暗评分。

三、模型评价体系

（一）生化与功能检测

（二）病理学验证

1. 大体观察：油红O染色显示主动脉弓或胸主动脉脂质条纹（红色斑块面积>10%）；

2. 组织学：

• HE染色：内膜厚度增加（>50 μm），泡沫细胞聚集；

• Masson染色：胶原纤维占比>40%；

3. 超微结构：电镜下可见内皮细胞脱落、基底膜暴露及脂质空泡。

四、模型优缺点对比

五、前沿研究方向

1. 动态监测技术：微型MRI联合近红外荧光探针实现斑块成分实时分析；

2. 类器官模型：3D打印血管支架联合原代细胞培养，模拟斑块微环境；

3. 多组学整合：单细胞测序揭示M1型巨噬细胞糖酵解通路在AS中的作用。

六、实验设计建议

1. 样本量：每组≥15只（考虑20%死亡率）；

2. 时间节点：

• 急性期：4周检测血脂与炎症因子；

• 慢性期：8-12周进行病理评估；

3. 伦理规范：异氟烷麻醉（浓度1.5%），术后布洛芬镇痛（5 mg/kg）。