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微量基因组DNA提取试剂盒的实验步骤

更新时间:2015-07-22点击次数:2483
微量基因组DNA提取试剂盒的实验步骤
使用微量基因组DNA提取试剂盒前请先在Buffer WB中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1. 取1-100μl抗凝血液到1.5ml离心管中。
2. 不足100μl的血液样本加Buffer ST1补足到100μl。
3. 加入10μl Foregene Protease,涡旋混匀。
4. 加入100μl Buffer ST2,轻轻颠倒混匀,简短离心以去除管盖及内壁的液滴。
5. 将离心管放置于65℃金属浴或水浴中10min,每间隔3min轻摇混匀一次。
6. 将混合液全部转移至离心柱中,12,000rpm(~13,400×g) 离心1min,弃掉收集管中的废液。
7. 将离心柱放回收集管中,向离心柱中加入500μl Buffer PW,12,000rpm(~13,400×g)离心1min,弃掉收集管中的废液。
8. 将离心柱放回收集管中,向离心柱中加入700μl Buffer WB,12,000rpm(~13,400×g)离心1min,弃掉收集管中的废液。
9. 重复步骤8一次。
10. 将离心柱放回收集管中,12,000rpm(~13,400×g) 空管离心1min。
11. 将离心柱转移至新的1.5ml 离心管中,向膜中央悬空滴加15-100μl 已于65℃预热的Buffer EB,室温放置5min,12,000rpm(~13,400×g) 离心1min。